登录  注册 退出

密码子图书馆

实验技能

  • RNA制备实用帖|血液样本的采集与保存

    RNA制备实用帖|血液样本的采集与保存

    在脊椎动物中,外周血一直被认为是侵害性较小、富有价值的检测样本。在许多生物样本库中,由于血液样本的常规收集、处理及保存方法简便、成本低且富含可利用成分和生物分子,因此是进行多种项目分析的理想实验材料。然鹅,科研僧们历经千辛万苦最后发现获得的...

  • qRT-PCR相对定量计算详解

    qRT-PCR相对定量计算详解

    做完转录组分析之后,一般都要求做qRT-PCR来验证二代测序得到的转录本的表达是否可靠。荧光定量PCR是一种相对表达定量的方法,他的计算方法有很多,常用的相对定量数据分析方法有双标曲线法,ΔCt法,2^-ΔΔCt法(Livak法),用参照基...

    qPCR
  • ELISA实验步骤及所需试剂耗材

    ELISA是酶联接免疫吸附剂测定(  Enzyme-Linked  Immunosorbnent  Assay  )的简称。它是继免疫荧光和放射免疫技术之后发展起来的一种免疫酶技术。此项技术自70年代初问世以来,发展十分迅速,目前已被广泛用...

  • 蛋白质稳定性的保持

    蛋白质稳定性的保持

    本篇内容为阅读《蛋白质纯化指南》(第二版)(陈薇主译) "第10章 蛋白质稳定性的保持"所作的读书笔记。【摘要】纯化过程中需要非常谨慎地保持目标蛋白质的完整和充足的活性。本章重点阐述在纯化和储存过程中保持蛋白质稳定所要牢...

  • 蛋白质浓缩和溶质的去除

    蛋白质浓缩和溶质的去除

    本篇内容为阅读《蛋白质纯化指南》(第二版)(陈薇主译) "第9章 蛋白质浓缩和溶质的去除"所作的读书笔记。【摘要】现有多种用于去除溶剂的方法,包括冻干、反向萃取、溶质析出、透析、超滤和层析技术。小型化和高通量的蛋白质分析...

  • Hortic Res | 逐步优化实时 RT-PCR 分析的优化方案

    Hortic Res | 逐步优化实时 RT-PCR 分析的优化方案

    查看原文   查看PDF『点击免费订阅《园艺研究》电子刊』实时荧光定量PCR(qPCR)是一种重要的分析基因表达水平的方法。该方法的准确性依赖于引物的特异性、扩增条件的优化和内参基因的稳定性。目前,引物设计主要考虑的是引物靶向特异性、引物G...

  • 文献分享 | RNA时间戳:敢问RNA芳龄几何?

    文献分享 | RNA时间戳:敢问RNA芳龄几何?

    “正因为你为你的玫瑰花费了时间,才使你的玫瑰变得如此重要。”——《小王子》人们常用“时间”这一标尺来衡量价值。对于个体生命而言,时间是有限而珍贵的。我们用“年龄”来度量生命存续的时间,作为追溯生命诞生的标记,也作为生命如影随形的“标签”。在...

  • 质粒构建及细胞转染技术

    质粒构建及细胞转染技术

    转染(transfection)指真核细胞由于外源DNA掺入而获得新的遗传标志的过程。常规转染技术可分为两大类,一类是瞬时转染,一类是稳定转染(永久转染)。前者外源DNA/RNA不整合到宿主染色体中,因此一个宿主细胞中可存在多个拷贝数,产生...

  • MPB:上海巴斯德所崔杰组-RNA病毒组与生物信息学分析

    MPB:上海巴斯德所崔杰组-RNA病毒组与生物信息学分析

    本实验方法旨在从目标样品中提取核酸并进行文库构建和高通量测序,从测序结果中挖掘新病毒信息,并做病毒组分析。

  • MPB:中大李文均组-河口水体和沉积物中微生物的分离培养与鉴定

    MPB:中大李文均组-河口水体和沉积物中微生物的分离培养与鉴定

    本文中的方法能够帮助在实验室条件下分离培养河口环境中的微生物,初步了解河口可培养微生物的多样性,并为后续的新分类单元的鉴定、功能菌株的筛选以及代谢产物的发掘输送优质的微生物资源。

  • MPB:沈阳生态所李琪组-​土壤线虫群落DNA提取、扩增及高通量测序

    MPB:沈阳生态所李琪组-​土壤线虫群落DNA提取、扩增及高通量测序

    本文针对目前利用高通量测序技术开展线虫研究存在的线虫富集以及线虫DNA提取等方面的问题,对提取土壤线虫DNA的方法进行了改进。

  • MPB:山大倪金凤组-培菌白蚁肠道簇虫分离与分子鉴定的方法

    MPB:山大倪金凤组-培菌白蚁肠道簇虫分离与分子鉴定的方法

    本文提供从培菌白蚁肠道中分离簇虫并进行分子生物学鉴定的方法,此方法也可用于从其它昆虫中分离鉴定簇虫。

  • MPB:地大郭东毅等-一种针对重金属污染土壤的高效DNA提取方法

    MPB:地大郭东毅等-一种针对重金属污染土壤的高效DNA提取方法

    重金属污染矿区环境中的微生物生态研究内容包括鉴别与发现重金属耐受菌属、揭示潜在重金属氧化还原过程、研究重金属污染生物修复策略等,而高效提取污染土壤中的DNA是研究的基础和关键。

  • 细胞不贴壁、生长缓慢是什么情况?

    细胞不贴壁、生长缓慢是什么情况?

    在细胞培养过程中会出现这样或那样的问题,这些问题从细胞生长角度来说,针对细胞不贴壁、生长缓慢、生长不好,甚至死亡的原因,我们做以下分析并提出相对应的解决方法。一、培养细胞不贴壁可能原因: ●胰蛋白酶消化过度 ;●支原体污染 ;●培养基pH值...

  • qPCR之SYBR染料法详解

    qPCR之SYBR染料法详解

    实时荧光定量PCR(qPCR)通过仪器实时检测反应体系中的荧光值变化,能够准确体现出模板中相应基因的相对表达量变化,成为生命科学领域一项非常重要且常规的技术。这项技术不仅能够检测不同样本中相应的基因表达量,并且被广泛应用于临床疾病诊断、食品...

    qPCR
  • 如何愉快地进行蛋白的共表达?

    如何愉快地进行蛋白的共表达?

    不少小伙伴都需要在同一个宿主(大肠杆菌或动物细胞等)进行多个外源基因同时表达。此时,有几个不同的策略: 1. 分别将基因构建到多个载体中,共转到同一个宿主,分别进行表达。这种构建模式是有的,但是经常用于一些特定的应用,比如某些Cas9基因编...

  • 【分子生物学】常用的内参基因及其使用范围

    【分子生物学】常用的内参基因及其使用范围

    包括GAPDH 、β- actin(BETA-actin) 、18sRNA、28sRNA 、B2M、ACTB、SDHA、HPRT1、ARBP内参基因等。1,在血清刺激条件下的基因表达定量研究中, B 22MG 和 18SrRNA 作为内参基...

    内参基因
  • ​简单四步,快速判断真菌是否成功侵染宿主植物

    涉及植物研究的小伙伴们应该对于真菌植物共生都有所了解,根瘤菌和大豆的共生就是教科书级别的经典案例。植物与真菌的共生作为农业生产中一种重要的共生关系,一直是农业科研工作者的研究热点。由于自然环境下的植物是具有本能的防御能力的,这就对共生真菌的...

  • 单细胞悬液制备解决方案

    单细胞悬液制备解决方案

    单细胞悬液制备服务开展单细胞RNA测序实验的第一步,通常要制备高质量的单细胞悬液。样本制备的具体方案因样本类型而异,例如血样,可以采用密度梯度离心的方法;对于组织样,通常采用机械法或酶解法,常用的消化酶包括 accutase,elastas...

    单细胞测序
  • Western Blot样品制备和蛋白表达检测注意事项

    Western Blot样品制备和蛋白表达检测注意事项

    Western Blot是分子生物学和蛋白质组学中最常用的技术之一。但Western Blot是一个多步骤的操作流程,因此任何一个步骤发生错误,都会导致最终的结果发生变异,从而降低了该技术的可靠性和可重复性。有研究表明,Western B

    Western Blot